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Title: Evaluación de tres crioprotectores para el almacenamiento en nitrógeno líquido de semillas de orquídeas nativas de Ecuador de los cuatro géneros Elleanthus, Epidendrum, Odontoglossum y Oncidium
Authors: Cueva Catucuamba, Esthela Elizabeth
Moya Araque, María Belén
Advisor: Vaca Suquillo, Ivonne de los Ángeles
Keywords: BIOTECNOLOGÍA DE LOS RECURSOS NATURALES
ORQUÍDEAS
CONSERVACIÓN DE LA NATURALEZA
ELLEANTHUS
Issue Date: Mar-2015
Abstract: En los últimos años las investigaciones de conservación realizadas por diferentes naturalistas y científicos, se han enfocado a preservar la Flora, ya que es parte fundamental de ecosistemas equilibrados. En el Ecuador, el nivel de endemismo de la familia Orchidaceae es alto, por lo que investigar alternativas de conservación es una importante herramienta con el fin de prolongar y asegurar su permanencia. El presente estudio se basó en el desarrollo de un protocolo de crioconservación de semillas de cuatro géneros de orquídeas Elleanthus, Odontoglossum, Epidendrum y Oncidium; mediante la evaluación de la interacción de los siguientes crioprotectores: C1 (1,5ml DMSO 1M), C2 (0,75ml de DMSO 1M+ 0,75ml de Sucrosa 1M), C3 (0,75ml de DMSO 1M+ 0,75ml de Glicerol 1M), C4 (0,5ml de DMSO 1M+ 0,5ml de Sucrosa 1M + 0,5ml de Glicerol 1M) y, dos técnicas de enfriamiento: Rápido (sumergidas directamente a -196°C); y, Escalonado (descenso de temperatura a -80°C y posteriormente a -1960C en nitrógeno líquido). El material vegetal se obtuvo del Banco de germoplasma de Orquídeas del Ecuador Fase I (sección Cotacachi-Cayapas) almacenado en el centro de investigación y valoración de biodiversidad CIVABI-UPS. Los resultados muestran que en la técnica de enfriamiento rápido, el mejor crioprotector es el C1 (Dimetilsulfóxido), con los mayores porcentaje de viabilidad en la prueba de tetrazolio (ex vitro) en los géneros Elleanthus, Epidendrum y Oncidium con un promedio de 66,3%, 57,9% y 47,5%, respectivamente. Mientras que, en Odontoglossum el C2 (Dimetilsulfóxido+Sucrosa) con técnica de enfriamiento escalonada, presentó los mejores resultados con un 66,55% de viabilidad. Para la variable porcentaje de turgencia (in vitro) el protocolo óptimo de almacenamiento de semillas para todos los géneros, fue la técnica rápida más C1 (Dimetilsulfóxido), presentando un rango de turgencia desde un 55% a 83,3%.
Description: In recent years conservation research conducted by different naturalists and scientists have focused on preserving the flora, since it is a fundamental part of balanced ecosystems. In Ecuador, the level of endemism of Orchidaceae is high, so investigate alternative conservation is an important tool in order to prolong and ensure their permanence. This study was based on the development of a cryopreservation protocol seed four orchid Elleanthus Odontoglossum, Epidendrum and Oncidium; by evaluating the interaction of cryoprotectants following: C1 (1,5ml DMSO 1M), C2 (0,75ml DMSO 1M + 0,75ml Sucrose 1M), C3 (0,75ml DMSO 1M + 0,75ml Glycerol 1M), C4 (0,5 DMSO 1M + 0,5ml Sucrose 1M+ 0,5ml Glycerol 1M) and two cooling techniques: Fast (submerged directly to -196 °C); and shoulder (temperature drop to -80 °C and subsequently in liquid nitrogen at -196 °C). The plant material was obtained from the genebank of Orchids of Ecuador Phase I (section Cotacachi-Cayapas) stored in the research and biodiversity assessment CIVABI-UPS. The results show that in the rapid cooling technique, is the best cryoprotectant C1 (Dimethylsulfoxide), with the largest percentage viability tetrazolium test (ex vitro) in Elleanthus gender, Oncidium and Epidendrum averaging 66, 3%, 57,9% and 47,5% respectively. While in Odontoglossum C2 (Dimethylsulfoxide + Sucrose) with stepwise cooling technique, showed the best results with a 66,55% viability. For variable rate turgor (in vitro) the optimal seed storage protocol for all genders was more rapid technique C1 (Dimethylsulfoxide), presenting a range of turgor from 55% to 83,3%.
URI: http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/9218
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