Identificación de subespecies de orquídeas pertenecientes al grupo de epidendrum nocturnum (orchidaceae), mediante la técnica molecular dna barcode

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Title: Identificación de subespecies de orquídeas pertenecientes al grupo de epidendrum nocturnum (orchidaceae), mediante la técnica molecular dna barcode
Authors: Ocaña Manzano, Erick Sebastián
Valencia Arboleda, Sabrina Nicole
Advisor: Cerna Cevallos, Marco Fernando
Abstract: The Epidendrum nocturnum group is a nomenclatural type of the genus Epidendrum. This specie is distributed throughout tropical America: Florida, Mexico, Colombia, Brazil, Venezuela, Peru, Ecuador and the Caribbean. It is estimated that there are approximately 35 species within this group. Epidendrum is the second largest genus in Ecuador, hence being so large generates a problem of classification of the species that compose it. DNA BARCODE is a molecular technique that facilitates the identification of species at the molecular level from sequenced DNA samples; however, it is not certain that the use of the chloroplastic genetic regions matK, ycf1 and rpoC1 can be used to make a specific differentiation at the subspecies level. Thus, plant samples were obtained from different areas of the country: Santo Domingo de los Tsáchilas, Imbabura, Pichincha, Napo and Pastaza to identify them by means of the aforementioned molecular technique. DNA was extracted by the Doyle and Doyle method, and a PCR was performed with these molecular markers to sequence the samples. The sequences obtained were then cleaned and those with a quality higher than 40% were used for the analyses; phylogenetic trees were prepared with the MEGA v 11.0 program, as well as a georeferencing map with the Google Earth platform. Finally, it was possible to conclude that the use of these molecular markers help to differentiate the subspecies of E. nocturnum, and observe a speciation phenomenon linked to the distribution of the different samples obtained due to changes at the genetic level.
Translated abstract: El grupo de Epidendrum nocturnum es un tipo nomenclatural del género Epidendrum. Esta especie está distribuida en toda América tropical: La Florida, México, Colombia, Brasil, Venezuela, Perú, Ecuador y el Caribe. Se estima que aproximadamente existen 35 especies dentro de este grupo. Epidendrum es el segundo género más grande en el Ecuador, por lo que al ser tan amplio genera un problema de clasificación de las especies que lo componen. DNA BARCODE es una técnica molecular que facilita la identificación a nivel molecular de especies, a partir de muestras de ADN secuenciadas, sin embargo, no se tiene la certeza de que el empleo de las regiones genéticas cloroplásticas matK, ycf1 y rpoC1 sirvan para poder realizar una diferenciación puntual a nivel de subespecies. Así, se obtuvieron muestras vegetales de distintas zonas del país: Santo Domingo de los Tsáchilas, Imbabura, Pichincha, Napo y Pastaza para identificarlas mediante la técnica molecular antes mencionada. Se extrajo ADN por el método de Doyle y Doyle, se procedió a realizar una PCR con dichos marcadores moleculares, para secuenciar las muestras. Seguidamente se procedió a limpiar las secuencias obtenidas y trabajar con las que tengan una calidad superior al 40%; con el programa MEGA v 11.0 se elaboraron los árboles filogenéticos, además de un mapa de georreferenciación con la plataforma Google Earth. Finalmente se pudo concluir que el empleo de estos marcadores moleculares sirve para diferenciar las subespecies de E. nocturnum, así mismo se evidencia el fenómeno de especiación ligado a la distribución de las diferentes muestras obtenidas y los cambios a nivel genético presentado.
Keywords: BIOTECNOLOGÍA
NOCTURNUM
ORCHIDACEAE
FILOGENIA
Issue Date: Feb-2023
URI: http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/24295
Language: spa
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