Western Blot como método diagnóstico de la hidatidosis humana, utilizando fluido del metacestodo de Echinococcus sp.

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Title: Western Blot como método diagnóstico de la hidatidosis humana, utilizando fluido del metacestodo de Echinococcus sp.
Authors: Ramos Sarmiento, Daniel Alexander
Advisor: Chiluisa Utreras, Viviana Pamela
Abstract: La hidatidosis o equinococosis es una enfermedad de distribución mundial producida por un platelminto parásito del género Echinococcus. El estado larval del cestodo desarrolla quistes en tejido hepático y pulmonar de ganado y humanos accidentalmente infectados. Las hidátides desarrolladas causan compresión a órganos circundantes, anafilaxis y muerte en pacientes. Se diagnostica mediante combinación de métodos de radioimagen e inmunoensayos, obteniéndose derivaciones no confiables. Así, se pretende desarrollar la técnica de Western Blot como método diagnóstico de la hidatidosis humana, utilizando fluido del metacestodo de Echinococcus sp., como análisis complementario a ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas- ELISA. Primeramente mediante valoración morfométrica de ganchos rostelares de protoéscolex presentes en la fracción sólida del fluido hidatídico de quistes arraigados al parénquima de tejido hepático porcino, se pudo identificar la especie Echinococcus granulosus, causante de la zoonosis parasitaria conocida como hidatidosis unilocular. Mediante el análisis preliminar de cribado por la prueba ELISA Indirecto casero Proyecto 2-programa PROPAD se seleccionaron 40 muestras sanguíneas pertenecientes a la seroteca del mismo programa. Los sueros nuevamente se cribaron por la misma técnica y posteriormente fueron evaluadas por el Kit Comercial NovaTec NovaLisa Echinococcus IgG ELISA, obteniendo 31 sueros con reacción negativa y 9 muestras con reacción positiva para hidatidosis humana. La totalidad de las muestras sanguíneas fueron evaluadas por Western Blot de forma cualitativa, corroborando con las mismas derivaciones que las pruebas ELISA mencionadas, por lo cual la técnica obtuvo una sensibilidad y especificidad del 100% siendo confiable para el diagnóstico
Translated abstract: Hydatidosis or echinococcosis is a disease of worldwide distribution produced by a parasitic flatworm of the genus Echinococcus. The larval stage of the cestode develops cysts in liver and lung tissue of cattle and humans accidentally infected. The developed hydatides cause compression to surrounding organs, anaphylaxis and death in patients. It is diagnosed by combining radioimage methods and immunoassays, obtaining unreliable leads. Thus, we intend to develop the Western Blot technique as a diagnostic method of human hydatidosis, using Echinococcus sp. Metacestodo fluid, as a complementary assay for enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Firstly, by means of morphometric evaluation of protoescolex rostellar hooks present in the solid fraction of hydatid fluid of cysts rooted in the parenchyma of porcine liver tissue, it was possible to identify the species Echinococcus granulosus, the cause of the parasitic zoonosis known as unilocular hydatidosis. By means of the preliminary screening analysis by the ELISA Indirect Home Project 2-program PROPAD, 40 blood samples belonging to the seroteca of the same program were selected. Again, the sera were screened by the same technique and later evaluated by the NovaTec NovaLisa Echinococcus IgG ELISA Commercial Kit, obtaining 31 sera with negative reaction and 9 samples with positive reaction for human hydatidosis. The totality of the blood samples were evaluated by Western Blot qualitatively, corroborating with the same derivations as the aforementioned ELISA tests, for which the technique obtained a sensitivity and specificity of 100% being reliable for the diagnosis.
Keywords: BIOTECNOLOGÍA DE LOS RECURSOS NATURALES
ECHINOCOCCUS
WESTERN BLOT
Issue Date: Mar-2018
URI: http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/15339
Language: spa
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