Aplicación del sistema de identificación molecular BARCODE para especies del género Epidendrum en Pichincha, Ecuador

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Título : Aplicación del sistema de identificación molecular BARCODE para especies del género Epidendrum en Pichincha, Ecuador
Autor : Díaz Guamangallo, Alisson Elizabeth
Quilachamin Llanganate, Joselyn Elizabeth
Director de Tesis: Cerna Cevallos, Marco Fernando
Resumen traducido: Ecuador has a great plant diversity, among these Orchids stand out, they are exclusive species of our Flora, one of the genera with the largest number of species are the Epidendrum, with more than 1000 species of which 306 species are registered and distributed in the Ecuadorian Andes, for this research was developed the molecular identification of 10 segments of plant tissue using the DNA BARCODE system, DNA was extracted from the samples using the Doyle and modified Doyle method and the Direct method, then the matK, ycf1 and rpoC1 regions were amplified using the conventional PCR technique, the sequencing was performed under the SANGER technique, finally the phylogenic tree was developed with the respective markers. To conclude, the results obtained indicate that the marker with the greatest variability is matk when compared to the other two markers. On the other hand, from the sequences obtained in GenBank, the Maximum Likelihood statistical estimation method with 500 replicates and the Tamura 3 parameter model were used to build a phylogenetic tree that allows the identification of the experimental samples and their genetic similarities.
Resumen : El Ecuador es rico en diversidad vegetal, entre las destacadas se encuentran las orquídeas, estas son especies exclusivas de la flora, uno de los géneros con mayor número de especies es Epidendrum, con más de 1000 especies, de las cuales 306 están registradas y distribuidas en el Ecuador, en específico en los Andes ecuatorianos. El presente estudio desarrollo la identificación molecular de 10 segmentos de tejido vegetal utilizando el sistema DNA BARCODE, el ADN se extrajo de muestras utilizando el método Doyle y Doyle modificado y el método directo seguido de amplificación de las regiones matK, ycf1 y rpoC1 mediante métodos de PCR convencionales, se realizó secuenciación según tecnología SANGER, y finalmente se construyó un árbol filogenético con sus respectivos marcadores. En general, los resultados obtenidos indicaron que el marcador con mayor variabilidad fue matK en comparación con los otros dos marcadores. Por otro lado, a partir de las secuencias obtenidas en GenBank, se utilizó el método de estadístico de estimación Maximum Likelihood con 500 réplicas y el modelo Tamura 3 parameter para construir un árbol filogenético que permita identificar las muestras experimentales y sus similitudes genéticas.
Palabras clave : BIOTECNOLOGÍA
EPIDENDRUM
BARCODE
MATK
Fecha de publicación : feb-2023
URI : http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/24254
Idioma: spa
Pertenece a las colecciones: Grado

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