Optimización del protocolo para la detección molecular mediante ensayos QPCR de Leptospira SPP. en diferentes vectores de la provincia del Guayas
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http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/26277| Título : | Optimización del protocolo para la detección molecular mediante ensayos QPCR de Leptospira SPP. en diferentes vectores de la provincia del Guayas |
| Autor : | Martínez Ávila, Karolen Liesél Montiel Friend, Ivan Andree |
| Director de Tesis: | De la Cruz Mora, María Alejandra |
| Co-tutor de Tesis: | Mora Jaramillo, Naomi Daniela |
| Resumen traducido: | Leptospirosis, a zoonotic infection caused by Leptospira, is a serious health issue with an estimated annual incidence of one case per 100,000 people in coastal areas, with 547 cases reported between 2016 and 2020. To address this challenge, a research project was conducted with the aim of enhancing disease detection through qPCR and optimizing protocols. Blood and urine samples from vectors in areas with leptospirosis outbreaks in the Guayas province were used. Different DNA extraction methods were compared, and various protocol sets "Master mix" were evaluated to identify the most efficient one. The commercial kit Qiagen DNeasy® Blood & Tissue Kit proved to be the most effective in DNA extraction. Additionally, the Promega GoTaq® Master mix was selected for the detection of Leptospira spp. as it adequately amplified the controls. The results indicated that the qPCR assay was specific in identifying Leptospira spp. without amplifying DNA from other related bacteria. This study contributes to improving the detection and prevention of leptospirosis, benefiting public health. |
| Resumen : | La leptospirosis, una infección zoonótica causada por Leptospira, es un problema de salud grave con una incidencia estimada de un caso por cada 100,000 personas anualmente en áreas costeras, con 547 casos notificados entre 2016 y 2020. Para abordar este desafío, se llevó a cabo una investigación con el objetivo de mejorar la detección de la enfermedad mediante qPCR y optimizar protocolos. Se utilizaron muestras de sangre y orina de vectores en áreas con brotes de leptospirosis en la provincia del Guayas. Se compararon diferentes métodos de extracción de ADN y se evaluaron varios conjuntos de protocolo "Master mix" para identificar el más eficiente. El kit comercial Qiagen DNeasy® Blood & Tissue Kit demostró ser el más efectivo en la extracción de ADN. Además, se seleccionó el Master mix Promega GoTaq® para la detección de Leptospira spp., ya que amplificó de manera adecuada los controles. Los resultados indicaron que el ensayo qPCR fue específico para identificar Leptospira spp. sin amplificar ADN de otras bacterias relacionadas. Este estudio contribuye a mejorar la detección y prevención de la leptospirosis, beneficiando la salud pública. |
| Palabras clave : | BACTERIA ADN LEPTOSPIROSIS SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD AMPLIFICACIÓN |
| Fecha de publicación : | 2023 |
| URI : | http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/26277 |
| Idioma: | spa |
| Pertenece a las colecciones: | Grado |
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