Diseño de un biosensor bacteriano para la identificación cualitativa de mercurio (Hg)

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Título : Diseño de un biosensor bacteriano para la identificación cualitativa de mercurio (Hg)
Autor : Ambar Eunice, Urgiles Vidal
Arana Veloz, Oscar Hugo
Director de Tesis: López Ulloa, Brenda Patricia
Resumen traducido: Heavy metals are toxic compounds for living beings due to their ability to bioaccumulate, which causes serious problems in ecosystems. Among them, mercury stands out as one of the most toxic pollutants due to its high capacity to cause health problems in exposed species. The most widely used reference technique for the detection of heavy metals is atomic absorption spectrophotometry, which is based on the absorption of radiant energy by atoms in their ground state. However, this technique is characterized by long waiting times for results and by the high costs associated with the acquisition and maintenance of equipment, as well as the necessary reagents. The objective of this research is to use biotechnological tools to optimize processes and improve the detection of heavy metals, such as mercury. To do this, a biological device was developed capable of identifying this compound by engineering a genetic sequence aimed at the production of a marker protein. The process was carried out on bacteria isolated from the Gulf of Guayaquil, which were subjected to a chemical transformation to allow their genetic manipulation. After completing the transformation, the selective capacity was evaluated, which showed a tipping point from 0.04 ppm in the concentration of mercury chloride (HgCl₂), however, the production of the GFP protein was not detected in the presence of cadmium (Cd), chromium (Cr), silver (Ag) and lead (Pb).The sensitivity of the bacteria to different concentrations 0.5 to 3.25 ppm of mercury (Hg) was evaluated, which was detected by mercury (Hg) through the production of green fluorescent protein (GFP).
Resumen : Los metales pesados son compuestos tóxicos para los seres vivos debido a su capacidad de bioacumulación, lo que provoca serios problemas en los ecosistemas. Entre ellos, el mercurio se destaca como uno de los contaminantes más tóxicos debido a su alta capacidad para causar problemas de salud en las especies expuestas. La técnica de referencia más utilizada para la detección de metales pesados es la espectrofotometría de absorción atómica, que se basa en la absorción de energía radiante por átomos en su estado fundamental. Sin embargo, esta técnica se caracteriza por largos tiempos de espera para obtener resultados y por los altos costos asociados a la adquisición y mantenimiento de equipos, así como a los reactivos necesarios. El objetivo de la presente investigación es utilizar herramientas biotecnológicas para optimizar los procesos y mejorar la detección de metales pesados, como el mercurio. Para ello, se desarrolló un dispositivo biológico capaz de identificar este compuesto mediante la ingeniería de una secuencia genética destinada a la producción de una proteína marcador. El proceso se realizó en bacterias aisladas del golfo de Guayaquil, las cuales fueron sometidas a una transformación química para permitir su manipulación genética. Tras completar la transformación, se evaluó la capacidad selectiva la cual se observó un punto de inflexión a partir de 0,04 ppm en la concentración de cloruro de mercurio (HgCl₂), Sin embargo, no se detectó la producción de la proteína GFP en presencia de cadmio (Cd), cromo (Cr), plata (Ag) y plomo (Pb). Se evaluó la sensibilidad de las bacterias frente a diferentes concentraciones 0.5 a 3,25 ppm de mercurio (Hg) la cual se obtuvo una detección de mercurio (Hg) mediante la producción de la proteína verde fluorescente (GFP).
Palabras clave : METAL PESADO
BIOSENSOR
MERCURIO
MODIFICACIÓN GENÉTICA
Fecha de publicación : 2024
URI : http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/28753
Idioma: spa
Pertenece a las colecciones: Grado

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