Identificación molecular de especies del género Restrepia (Orchidaceae), colectadas en Centro y Sudamérica, mediante el sistema DNA BARCODE

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Título : Identificación molecular de especies del género Restrepia (Orchidaceae), colectadas en Centro y Sudamérica, mediante el sistema DNA BARCODE
Autor : Ruiz Velástegui, Michelle Estefanía
Torres Vásconez, Fausto Enrique
Director de Tesis: Benítez Quintana, Andrea Denisse
Resumen traducido: The genus Restrepia is distinguished from other genera of the Orchidaceae family by the attenuation of the dorsal sepal and the arrangement of osmophores in its structure. There are 61 species of Restrepia, distributed throughout Central and South America, from Guatemala to Bolivia through countries such as Venezuela, Colombia, Peru, and Ecuador. The identification of the species of this genus is very complicated because they have very similar morphological characteristics, and there is no complete classification of all the species described so far. In this work, plant samples of the genus Restrepia collected previously on different locations in Central and South America, were processed by first obtaining their DNA using the modified Doyle & Doyle method. Afterwards they were amplified with the molecular markers rpoC1 and matK by conventional PCR with the Platinum™ Direct PCR Universal Master Mix kit, and phylogenetic trees were elaborated with the resulting sequences using the Bayesian Inference and Maximum Likelihood methods, with the evolutionary models (JC) and (T92) respectively. In addition, a georeferencing of the samples from the countries of Central and South America was carried out, demonstrating a significant presence of species of the genus Restrepia throughout the region, especially in Colombia. After the investigation carried out, it was determined that the matK marker is not suitable for the identification of species of the genus Restrepia because it is a highly conserved region, while rpoC1 is not discriminative enough, for which reason it was not possible to obtain enough information to make an adequate identification of species of this genus.
Resumen : El género Restrepia, se distingue de otros géneros de familia Orchidaceae por la atenuación del sépalo dorsal y la disposición de osmóforos, en su estructura. Se reconocen 61 especies de Restrepia, distribuidas en todo Centro y Sur América, que va desde Guatemala hasta Bolivia pasando por países como Venezuela, Colombia, Perú, y Ecuador. La identificación de las especies de este género es muy complicada ya que presentan características morfológicas muy similares, y no se cuenta con una clasificación completa de todas las especies descritas hasta el momento. En este trabajo se analizaron muestras vegetales del género Restrepia, colectadas previamente en zonas de Centro y Sur América. Se extrajo el ADN mediante el método Doyle & Doyle modificado y se obtuvieron los amplicones de las regiones rpoC1 y matK mediante PCR convencional. Se empleó la metodología de Sanger para obtener las secuencias y se realizaron análisis filogenéticos con los métodos de Inferencia Bayesiana y Máxima Verosimilitud, con los modelos evolutivos Jukes Cantor (JC) para rpoC1 y Tamura-3-parameter (T92) para matK. Además, se realizó una georreferenciación a las muestras de los países de Centro y Sur América demostrando una presencia significativa de especies del género Restrepia a lo largo de la región en especial en Colombia. Después de la investigación realizada se determinó que el marcador matK no es adecuado para la identificación de especies del género Restrepia; debido a que es una región muy conservada, mientras que rpoC1 no es lo suficientemente discriminativo, por lo cual no se pudo obtener suficiente información para realizar una identificación adecuada de especies de este género
Palabras clave : BIOTECNOLOGÍA
ORCHIDACEAE
FILOGENIA
RPOC1
Fecha de publicación : feb-2023
URI : http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/24326
Idioma: spa
Pertenece a las colecciones: Grado

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