EFECTO DE FACTORES EMBRIOTRÓFICOS A DIFERENTES TENSIONES DE OXÍGENO EN CULTIVO IN VITRO SOBRE EL DESARROLLO EMBRIONARIO DE ALPACAS HASTA LA ETAPA DE BLASTOCISTO

Abstract

La alpaca es el camélido sudamericano doméstico de mayor importancia para el Perú, país que a nivel regional cuenta con el 87% de estos animales. Ya que las formas tradicionales de reproducción no garantizan su calidad genética, la reproducción in vitro es una alternativa para su mejoramiento. Este estudio evaluó la influencia de los factores embriotróficos de desarrollo epidérmico (EGF) y de crecimiento insulínico (IGF-1) y tensiones de oxígeno en el desarrollo in vitro de ovocitos de alpaca hasta la etapa de blastocistos. A partir de ovarios de animales sacrificados, se obtuvieron ovocitos que se colocaron en medio TCM-199, suplementado con piruvato de sodio, glutamina, estradiol (E2), hormona folículo estimulante (FSH), hormona luteinizante (LH), factor embriotrófico (EGF o IGF-1), 5% de suero fetal bovino y gentamicina (10μL/mL) durante 32 horas, a 38,5 C, con 5% de CO2 y humedad relativa mayor de 95%, con tensiones O2 entre 6 y 20%. Posteriormente, los ovocitos fueron fecundados con semen fresco y cultivados en medio KSOMaa durante 48 horas. Los cultivos fueron diferenciados por factores de crecimiento (EGF e IGF-1) y tensiones de O2 (6% y 20%), más el grupo control sin suplementar con EGF o IGF-I, para valorar las tasas de división de ovocitos y blastocistos a partir de ovocitos. Mediante análisis de conglomerados, se establecieron diferencias significativas entre los tratamientos con a = 0,05 para cada variable de respuesta, observándose la mayor tasa de divisiones de ovocitos (24,8%) con EGF a 6% de O2 y la mayor producción de blastocistos/ovocito (18,4%) con IGF-1 a 6% de O2 . Se concluye que la adición de factores embriotróficos y una baja tensión de O2 son favorables para el desarrollo embrionario in vitro en alpacas./ The alpaca is the most important South American domestic camelid for Peru, a country that regionally has 87% of these animals. Since traditional forms of reproduction do not guarantee its genetic quality, in vitro reproduction is an alternative for its improvement. This study evaluated the influence of embryotrophic factors of epidermal development (EGF) and insulin-like growth factor (IGF-1) and oxygen tension on the in vitro development of alpaca oocytes up to the blastocyst stage. From ovaries of sacrificed animals, oocytes were obtained and placed in TCM-199 medium, supplemented with sodium pyruvate, glutamine, estradiol (E2), follicle stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH), embryotrophic factor (EGF or IGF-1), 5% fetal bovine serum and gentamicin (10μL/mL) for 32 hours, at 38.5 C, with 5% CO2 and relative humidity greater than 95%, with O2 tensions between 6 and 20%. Subsequently, the oocytes were fertilized with fresh semen and cultured in KSOMaa medium for 48 hours. Cultures were differentiated by growth factors (EGF and IGF-1) and O2 tensions (6% and 20%), plus the control group without EGF or IGF-I supplementation, to assess oocyte and blastocyst division rates from oocytes. By cluster analysis, significant differences were established between treatments with a = 0.05 for each response variable, with the highest rate of oocyte divisions (24.8%) with EGF at 6% O2 and the highest blastocyst/oocyte production (18.4%) with IGF-1 at 6% O2. It is concluded that the addition of embryotrophic factors and low O2 tension are favorable for in vitro embryo development in alpacas.