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Title: Desarrollo de un Protocolo de propagación in vitro de Geranium chilloense Wild. ex Kuth. Y Lupinus pubescens Benth. Para la obtención de plantas completas, para la primera etapa de restauración de las quebradas de Quito
Authors: Benavides Silva, Thaly Gabriela
Córdova Muñoz, Adriana Isabel
Advisor: Vaca Suquillo, Ivonne de los Ángeles
Keywords: BIOTECNOLOGÍA DE LOS RECURSOS NATURALES
GERANIUM CHILLOENSE WILD.
EX KUNTHLUPINUS PUBESCENS
BENTHCULTIVO IN VITRO
Issue Date: May-2015
Abstract: Geranium chilloense Willd. ex Kunth conocida con el nombre de geranio de los Chillos, es una planta ornamental, nativa de Los Andes que se encuentra de manera silvestre en las quebradas del Distrito Metropolitano de Quito (Jaramillo, 2013, p. 86) y, forma parte de la historia de la flora nativa de Quito, ya que ha sido descrita desde la expedición de Alexander Humboldt y Aimé Bonpland en 1802 (Ruales & Guevara, 2010, pp. B54-B63). Lupinus pubescens Benth, conocida también con el nombre de Ashpa chocho o Allpa chocho, es una planta herbácea, nativa y ornamental debido a la belleza de sus flores, declarada como una de las siete especies emblema de la flora quiteña (USFQ, 2012). El presente estudio se realizó con el propósito de desarrollar un protocolo de propagación in vitro de Geranium chilloense Willd. ex Kunth.y Lupinus pubescens Benth., para la obtención de plantas completas. En geranio de los Chillos, la mejor escarificación consistió en tres días de hidratación, seguida de una inmersión de dos horas en una solución de ácido acético al 10 % + 90% de agua destilada estéril, obteniendo un mayor porcentaje de germinación (31%). Para la desinfección se determinó, que el protocolo P1, que se basa en sumergir en alcohol al 96% (10 seg), luego hipoclorito de sodio 50% v/v (3% p.a), al lograr un cero de contaminación bacteriana, y el protocolo P3 que se basa en sumergir en etanol al 70% (1 min), luego en hipoclorito de sodio al 20% v/v (1,2 p.a) más tween (20 min), al obtener baja contaminación fúngica (3%), siendo ambos protocolos favorables para la desinfección. Mientras que en la etapa de introducción el medio MS reducido a 25% de la concentración de sus sales obtuvo mayor porcentaje de germinación (41%). En la multiplicación se logró mayor número de brotes (3,88) con el tratamiento T2 que consistió en 0 ppm de BAP y 0,5 ppm de AIA. Y finalmente en la fase adaptación al sustrato la turba estéril dio los mejores resultados para variable prendimiento (81%). Para el chocho, se logró una desinfección óptima al utilizar el tratamiento P1, con alcohol etílico al 96% (10 seg), seguido de hipoclorito de sodio al 50% v/v (10 min), obteniendo bajo porcentaje de contaminación bacteriana (2%) y fúngica (5%); en cuanto a la introducción al medio de cultivo, se escogió el medio MS reducido a la mitad de su concentración, ya que presentó el 100% de germinación. En la multiplicación, el tratamiento T5 con 1 ppm BAP y 0,5 ppm AIA, logró un mayor promedio de índice de multiplicación (3,22). En la fase de enraizamiento se obtuvo mayor porcentaje de presencia de raíces (64%) con 1 ppm de ANA combinado con 1000 mg de carbón activado y finalmente en la fase de adaptación al sustrato la fibra de coco mostró los mayores porcentajes de prendimiento (71%) y sobrevivencia (79%).
Description: Geranium chilloense Willd. ex Kunth known as geranio de los Chillos, is an ornamental plant, native of Los Andes it can be found in a wild way in the ravines of the Metropolitan District of Quito and it is part of the history of the native flora of Quito since has been described from the Alexander Humboldt and Aimé Bonpland expedition in 1802. Lupinus pubescens Benth, also known as Ashpa chocho or Allpa chocho, is an herbaceous, native and ornamental plant due to the beauty of his flowers, declared as one of the Seven Species emblem of the flora of Quito. The present study was realized by the intention of developing a protocol for the propagation in vitro of Geranium chilloense and Lupinus pubescens to obtain complete plants. In Geranium chilloense, the best scarification consisted of three days of hydration followed by a two-hour immersion in a solution of acetic acid 10% + 90 % sterile distilled water, obtaining a higher germination percentage (31%). It was determined that P1 protocol that is based on immersed in alcohol at 96% (10 sec), then in hypochlorite sodium at 50% v/v (3% p.a), to achieve a zero of bacterial contamination and P3 protocol that is based on immersed in ethanol 70% (1 min), then in hypochlorite sodium at 20% (1,2 p.a) plus tween (20 min), obtaining low fungal contamination (3%), both being favorable for disinfection protocols. In the stage of introducing the MS medium reduced to 25 % of the concentration of salts obtained higher germination percentage (41%). For multiplication was greater number of shoots (3,38) with T2 treatment which consisted of 0 ppm 0,5 ppm of IAA and BAP. And finally during the adaptation to the substrate the best results for variable grafting (81 %). For chocho, an ideal disinfection was achieved on having used the treatment P1, with ethyl alcohol at 96 % (10 sec), followed by sodium hypochlorite at 50 % v/v (10 min), obtaining low percentage of bacterial contamination (2%) and fungal (5%); as for the introduction to the culture medium, the MS diminished to the half of his concentration was chosen on having reached 100 % of germination. In multiplication, the treatment T5 with 1 ppm BAP and 0,5 ppm AIA, achieved a higher average rate of multiplication (3,22). In the rooting phase higher percentage of presence of roots (64%) was obtained with 1 ppm of ANA combined with 1000 mg of activated charcoal and finally at the stage of adaptation coconut fiber substrate showed higher percentage of grafting (71%) and adaptability (79%).
URI: http://dspace.ups.edu.ec/handle/123456789/9372
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