Identificación molecular de cepas de levaduras con capacidad fermentativa y resistencia alcohólica aisladas de pitahaya (Stenocereus queretaroensis f.a.c Weber).

Abstract

El presente trabajo se basó en el uso de seis levaduras aisladas del fruto de pitahaya (Stenocereus queretaroensis f.a.c Weber) del Proyecto de Coba P. (2013-2014) CIVABI - UPS, mismas que presentaron resistencia alcohólica entre 10 - 12 % y capacidad fermentativa media – alta, para su identificación molecular; ya que los ensayos bioquímicos previos RapID Yeast Plus System no presentaron especificidad en su identificación debido a los diferentes estados anamorfos verificados posterior a los ensayos microscópicos. Para la identificación molecular de las levaduras se amplificó la región ITS por medio de PCR empleando los primers ITS 1 e ITS 4; las cepas puras fueron secuenciadas por Sanger, los consorcios a través de técnicas de secuenciación de nueva generación. En el análisis de las secuencias se pudo identificar en cepas puras la especie Pichia kudriavzevii con análisis BLAST QC de 100% e Ident 100% y Fungal sp. con QC de 100% e Ident 100%. Para la interpretación de la secuencias de los consorcios se empleó el software Geneious R8 (Biomatter Ltd) que permite obtener secuencias consenso para posterior análisis en BLAST. Los consorcios N010/3/D y N019/3/D estuvieron conformados por el orden Saccharomycetales con QC 99% e Ident 92%; individuos del género Pichia sp. con QC 99% e Ident 91%, y la especie Pichia kluyveii con QC 100% e Ident 97%. A pesar de los resultados obtenidos no se puede asegurar el número total de especies que conforman cada consorcio.